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神經(jīng)科學研究新工具：干粉培養(yǎng)基在Neuro-2a細胞分化中的應用實測
Neurobasal-A神經(jīng)元干粉培養(yǎng)基一種專為神經(jīng)細胞培養(yǎng)設計的基礎培養(yǎng)基，適用于新生和成年腦神經(jīng)元的長期維持和成熟，廣泛應用于神經(jīng)科學研究領域?。Neurobasal-A神經(jīng)元干粉培養(yǎng)基適用于大多數(shù)神經(jīng)元細胞應用，特別是新生和成體腦神經(jīng)元的長期維持和成熟。它可以在不添加膠質細胞飼養(yǎng)層的情況下，長期和短期地維持神經(jīng)細胞的同源群落的存活。
Neurobasal-A神經(jīng)元干粉培養(yǎng)基成分說明
Neurobasal-A神經(jīng)元干粉培養(yǎng)基配置方法
| 形態(tài) | 粉末 |
| L-谷氨酰胺 | 無 |
| D-葡萄糖 | 4500 mg/L |
| 丙酮酸鈉 | 25 mg/L |
| HEPES緩沖劑 | 2600 mg/L |
| 酚紅指示劑 | 8.1mg/L |
| 儲存條件 | 2-8℃ 密閉、避光 |
| 運輸條件 | 常溫 |
| 有效期 | 36個月 |
1. 配制用水應使用純化水、超純水或注射用水，配制過程中水溫應控制在20-30℃。
2. 于配制容器中加入90%配制體積的配制用水（如需配制1 L則這里加900 mL配制用水），開啟培養(yǎng)基配制容器的混合系統(tǒng)（建議混合系統(tǒng)單位體積輸入功率大于10 W/m3），充分攪拌，攪拌時應避免氣泡的產(chǎn)生。
3. 根據(jù)所需配制體積，計算所需粉末質量，按照12.92 g/L比例稱取粉末培養(yǎng)基（如需配制1 L則需稱取12.92 g粉末）。將準確稱的培養(yǎng)基干粉加入到步驟【2】的配制容器中，充分攪拌20 min以上，直至粉末完-全溶解；
4. 待溶液完-全澄清后，根據(jù)配制體積，按照2.2 g/L比例稱取碳酸氫鈉（分析純）粉末，緩慢加入到步驟【3】的溶液中，繼續(xù)攪拌5-10 min至溶解；
5. 加配制用水將完-全溶解的步驟【4】溶液精確定容至100%配制體積（如需配制1 L則定容至1 L）。
6. 測量pH值，必要時用1 mol/L氫氧-化鈉溶液或1 mol/L鹽酸溶液調整pH值至7.20-7.30；由于過濾會使培養(yǎng)基pH值稍微偏高，因此此處比目的pH值（7.20-7.40）要低一些。
7. 用孔徑為0.2 μm的濾膜正壓過濾除菌（注意無菌操作）。
8. 過濾結束可以取少許液體培養(yǎng)基進行菌檢，待合格后再使用。
9. 過濾后的培養(yǎng)基液體應立即使用或存放于玻璃瓶、培養(yǎng)基瓶（PET）或具有隔氧涂層的一次性儲液袋中，2-8℃避光保存，此時液體培養(yǎng)基保質期為1年。
Neurobasal-A神經(jīng)元干粉培養(yǎng)基注意事項
1. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套及口罩操作；
2. 為保持本產(chǎn)品的最佳使用效果，請務必按照建議的儲存條件進行保存；
3. 產(chǎn)品僅供科學研究或進一步生產(chǎn)使用，不可用于臨床診斷或治療。
Neurobasal-A神經(jīng)元干粉培養(yǎng)基常見問題
Q：單獨的 Neurobasal-A培養(yǎng)基或添加了 B-27 添加劑的 Neurobasal 培養(yǎng)基能否冷凍以延長產(chǎn)品保質期？
A：不建議冷凍培養(yǎng)基，因為解凍時可能會形成沉淀；配方中的無機鹽和氨基酸在溫度波動時可能會從溶液中析出，這些沉淀一旦形成，就不容易再回到溶液中。
Q：我可以添加什么補充劑到Neurobasal-A培養(yǎng)基中來培養(yǎng)我的神經(jīng)細胞？A：可以添加B-27補充劑（不含維A，PB180638）來培養(yǎng)神經(jīng)干細胞；培養(yǎng)海馬神經(jīng)元和其他神經(jīng)元細胞可添加B-27(含維A，PB180637）或N-2添加劑（PB180641)；用于原代膠質細胞、星形膠質細胞、星型膠質表型的腫瘤細胞系（星形膠質細胞和膠質瘤）的培養(yǎng)，可以使用G-5添加劑（PB180640）。
Q：Neurobasal-A干粉培養(yǎng)基制備液體培養(yǎng)基過程中需要控溫多少呢？
A：溶解的溫度控制在室溫即可也就是20-30℃。
Q：Neurobasal-A干粉培養(yǎng)基為什么要額外添加碳酸氫鈉，不能提前加在干粉里配制時直接溶解嗎？
A：細胞培養(yǎng)基中的碳酸氫鈉（NaHCO3）通常并不包含在干粉形式的培養(yǎng)基內，而是作為單獨的成分，在配制培養(yǎng)基溶液的過程中另外添加。主要原因包括：1. 碳酸氫鈉在一定條件下容易分解，并且對二氧化碳敏感，如果預先混入干粉培養(yǎng)基中，可能會影響其穩(wěn)定性并導致有效成分失效。2. 由于不同實驗室的二氧化碳濃度以及操作者配制時的具體條件（例如溫度、時間）可能不同，因此在最終配制液體培養(yǎng)基時才加入碳酸氫鈉，可以根據(jù)實際需求調整其濃度，以確保培養(yǎng)基達到理想的pH值。3. 將碳酸氫鈉獨立存儲還可以方便運輸和長期儲存干粉培養(yǎng)基，因為碳酸氫鈉受潮后可能引起結塊，影響其溶解性能。