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液相色譜儀在手性藥物分析中的應用
在生物體內,幾乎所有具有重要生理意義的有機生物分子都有手性(chirality),絕大多數都是旋光性物質。兩種化學組成、分子式*相同的化合物,但因組成化合物的原子在空間取向不同,而成為鏡像的化合物,稱為手性化合物。由于對映體的物理、化學性質相同,實現它們的分離就比較困難,如大多數氨基酸都有右旋體和左旋體,但往往只能獲得右旋體和左旋體的混合物。手性藥物往往呈現一種對映體具有強的生物活性和藥效,而另一種卻無效。
近年來,對手性藥物的拆分定量分析進行了廣泛深入的研究。其中,對生物體液中藥物對映體的分離分析,有利于了解各種對映體的藥代動力學、體內代謝過程和生物利用度。因此對手性藥物對映體的拆分也是液相色譜儀分析的熱點。手性HPLC拆分法是以現代HPLC技術為基礎引入手性環境使對映異構體間呈現物理特征的差異而進行分離。液相色譜法拆分手性藥物對映體可分為直接法和間接法。前者是將不對稱中心引入分子間,可分為手性流動相添加劑(CMP)法和手性固定相(CSP)法;后者又稱為手性試劑衍生化(CDR)法,它是將不對稱中心引入分子內。
手性試劑衍生化法是將對映體經手性試劑衍生,生成非對映異構體后,利用常規HPLC方法進行分離和測定。適用于不宜直接拆分測定的化合物如手性脂肪胺類、醇類等。該法分離效果好,分離條件簡便,但對手性衍生試劑的要求較高,操作比較麻煩,多在其它方法無法實現時才采用。對生物樣品中對映體拆分過程中,由于內源性物質及代謝產物的干擾,單用液相色譜儀分析,易造成譜峰重疊,不能直接分析體內手性藥物。目前,使用多柱偶聯技術已成功解決了該類問題。
目前,HPLC是在手性藥物拆分中應用zui多的方法之一,可以預見,該方法因其具有快速、方便、的特點,在未來的手性藥物研究中,將得到更廣泛的應用。