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尿中兒茶酚胺代謝產物含量檢測法在神經母細胞瘤早期診斷中的價值
小兒神經母細胞瘤(NB)是目前威脅兒童生命的主要腫瘤之一,發病率約占全部惡性腫瘤患兒的7%,而病死率卻占其15%,僅次于白血病。目前NB診斷方法有B超定位、香草扁桃酸(VMA)層析法、骨髓細胞形態學、病理及單克隆抗體檢測等。B超定位能發現腫瘤的部位、大小,但腫瘤小于2cm時不易發現。骨髓細胞形態學檢查只能對有骨髓轉移的NB患兒作出診斷,單克隆抗體是檢測患兒血液、骨髓或病理活體組織的一種免疫方法,難以早期診斷NB。
利用HPLC法測定隨機尿中VMA、HVA的含量,以尿中肌酐(Cr)量標化標本中的VMA、HVA濃度,表示VMA、HVA的含量,探討其在NB早期診斷及篩查中的意義。
測定方法:取被測尿液離心(3000r/min,5min),其上清經孔徑0.22µm濾膜加壓過濾。濾液用0.01mol/L鹽酸10倍稀釋,并加入DHBA至4.0µ mol/L。尿稀釋液20µL注入液相色譜儀中,用流動相洗脫,電化學檢測器檢測。取尿樣100µL,用比色法在全自動生化分析儀上測定尿Cr量。采用標準品保留時間及樣品加標準品相結合的方法做為定性指標。每日試驗時,分別取不同濃度的標準液(VMA為2.50、1.25、0.625µmol/L,HVA為5.00、2.50、1.25µmol/L,DHBA為4.0µmol/L)20µL進行HPLC分析。用內標法,以峰面積計算被檢尿液中VMA、HVA濃度,再用尿Cr含量予以標化尿中VMA、HVA濃度。