放射性配體結(jié)合測定法測量平衡解離常數(shù)(KD),但它不能直接測量結(jié)合(Ka) 和解離 (Kd)動力學(xué)常數(shù)。表面等離子體共振(SPR)是一種廣泛使用的無標(biāo)記檢測技術(shù),用于測量平衡解離常數(shù)和動力學(xué)常數(shù)。自 1990 年代商業(yè)化以來,SPR 已成為生物醫(yī)學(xué)研究、生物傳感器開發(fā)和藥物發(fā)現(xiàn)的核心工具。然而,傳統(tǒng)的SPR技術(shù)研究膜蛋白具有挑戰(zhàn)性,主要是由于純化后蛋白質(zhì)的總體效率以及蛋白質(zhì)穩(wěn)定性變差。由于這些原因,只有極少數(shù)例報道了膜蛋白的SPR研究。而SPR顯微鏡(SPRM)則是一種將高分辨率光學(xué)顯微鏡與SPR技術(shù)相結(jié)合的新技術(shù)。SPRM的一個優(yōu)勢是它能夠直接測量平衡結(jié)合親和力和配體-膜蛋白相互作用的動力學(xué),此外SPRM是一種無標(biāo)記技術(shù),因此無需使用放射性同位素進(jìn)行實驗測定。
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