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二手羅氏 LightCycler® 96 實時熒光定量PCR儀詳盡介紹
一、引言
隨著分子生物技術的廣泛應用,實時熒光定量聚合酶鏈式反應(real-time quantitative PCR, 簡稱qPCR)已成為核酸定量分析中常用的一種手段。羅氏公司推出的 LightCycler® 96 實時熒光定量PCR儀是一款中小通量的qPCR系統,專為日常科研、教學實驗及基礎臨床研究而設計。相較新機,二手 LightCycler® 96 儀器因其成本較低、核心功能完整、維護便捷,成為眾多實驗室設備更新或擴充中的可選方案之一。
本文將從儀器組成、技術參數、應用場景、使用注意事項及選購建議等方面,對二手 LightCycler® 96 儀器進行系統性介紹。
二、系統構成
LightCycler® 96 實時熒光定量PCR儀整體結構簡潔,易于操作與維護,主要包括:
主機本體
集成熱循環模塊與熒光檢測模塊,采用封閉箱體結構,減少環境干擾。樣品支持系統
支持96孔標準qPCR反應板,樣本容量靈活,適合常規樣本量的實驗設計。多通道熒光檢測系統
配備4個熒光通道,可支持多種熒光染料與探針組合,適應不同實驗需求。控制與分析軟件
LightCycler® 96 軟件界面友好,功能包括數據實時采集、Ct值分析、標準曲線繪制、熔解曲線生成等。配件與附件
包括樣品離心板、壓膜器、計算機連接線、校準卡與標準耗材組件等。
三、技術參數
項目 | 技術規格 |
---|---|
支持樣本容量 | 96孔反應板 |
通量范圍 | 1–96個樣本/運行 |
熒光檢測通道數 | 4通道(FAM, HEX, ROX, Cy5) |
支持染料 | SYBR Green I、TaqMan、FRET、Scorpion等 |
溫控范圍 | 37–99°C |
升溫/降溫速率 | 4.4°C/s / 2.2°C/s |
溫度均一性 | ±0.2°C(30秒) |
最小檢測拷貝數 | 1–10個拷貝 |
定量范圍 | 101 – 10? 拷貝 |
操作系統兼容性 | Windows 10、Windows 11(視軟件版本而定) |
四、主要功能與特點
1. 多色熒光檢測
儀器配備四通道檢測系統,能夠實現最多四種不同靶標的同時檢測,適用于雙重或多重PCR反應方案。在診斷、基因分型或病原體篩查等多目標實驗中有廣泛適應性。
2. 快速熱循環控制
得益于其精準的溫控模塊,LightCycler® 96 能在較短時間內完成一個完整的PCR循環,提升實驗效率,尤其適合批量樣本的日常分析需求。
3. 實時數據分析
軟件可自動生成擴增曲線、標準曲線、熔解曲線、Ct值表格等數據,便于用戶快速獲得結果并作進一步分析。
4. 熔解曲線分析
支持常規與高分辨率(HRM)熔解曲線分析,用于檢測基因突變、堿基多態性等小變異。
5. 操作簡便
該儀器設計注重用戶體驗,軟件界面清晰,參數設置合理,適合科研初學者及中級用戶快速上手。
五、典型應用場景
1. 醫學研究與分子診斷前期分析
基因表達水平定量(如癌癥標志物表達)
病毒核酸檢測(如HBV、HPV、SARS-CoV-2等)
微生物載量檢測與抗藥性基因分析
2. 藥物篩選與藥效驗證
藥物處理前后基因表達變化檢測
信號通路相關基因的表達波動追蹤
siRNA/miRNA作用機制評價
3. 動植物基因研究與轉基因篩選
轉基因作物的外源基因定量
物種溯源及遺傳背景分析
植物病害相關基因表達水平研究
4. 教學與基礎培訓實驗
qPCR基礎技能培訓
實驗原理教學演示
實驗設計與數據分析訓練
六、二手設備的價值與使用建議
優勢:
經濟實用:適合預算有限的中小型實驗室或教學單位。
性能可靠:核心溫控與檢測模塊耐用,經過保養后仍可長期運行。
結構緊湊:適合空間有限的實驗環境布置。
維護成本低:維修配件易得,常規維護操作簡單。
注意事項:
核查使用記錄與保養情況:重點檢查溫控性能是否正常、熒光通道是否存在漏檢或信號衰減問題。
校準狀態與軟件授權:是否附帶原廠或第三方校準文件,軟件是否具備完整授權。
兼容性問題:軟件是否兼容當前操作系統,是否有配套硬件控制單元。
配件完整性:原配附件是否齊全,是否包含熱蓋、壓膜器、適配器等核心組件。
七、操作與維護建議
日常操作注意事項:
使用前確保反應板密封良好,避免熒光信號泄漏。
實驗前進行系統自檢,確保光路與溫控系統穩定。
建議定期進行陰性對照、重復孔設置以檢測系統誤差。
定期維護建議:
每次使用后清理樣本托盤及熱蓋區域。
每3–6個月進行溫控校準與光路檢測,確保信號采集準確。
如長期不使用,應進行設備封存,并防止潮濕環境侵蝕電路部件。
八、選購二手 LightCycler® 96 的建議
優選來源可靠的正規供應商,如科研儀器回收商、二手醫療設備平臺等,避免從來歷不明渠道購入無售后保障的儀器。
建議要求試機演示,驗證加熱模塊、四通道信號響應情況及軟件操作界面是否正常。
若條件允許,可配合第三方檢測機構進行校準與維護認證,確保儀器狀態適用于科研與教學場景。
九、結語
LightCycler® 96 實時熒光定量PCR儀以其穩定的性能、簡便的操作和靈活的軟件支持,在基礎研究、教學實驗與初級臨床應用中有著廣泛的適用性。對于預算有限或尋求性價比解決方案的實驗室而言,選購二手該型號設備是一種可行的選擇。
通過規范的操作流程與合理的使用維護,即使是二手設備,也能夠長期保持良好的檢測狀態,為科研與應用提供可靠數據支持。隨著科研設備的可持續使用理念推廣,二手 LightCycler® 96 有望繼續在多個科研場景中發揮其作用。