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杭州實了個驗生物科技有限公司
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瀏覽次數賽默飛CO?培養箱滅菌程序詳解
一、引言
CO?培養箱是現代生命科學研究中關鍵的實驗設備，主要用于細胞、組織以及微生物的體外培養。為了保障實驗結果的可靠性與樣品的生物安全，控制污染是使用過程中必須面對的重要問題。污染可能來源于空氣顆粒、水盤、操作失誤、培養容器滲漏或前一次實驗殘留的微生物。
為應對這些潛在風險，許多CO?培養箱廠商在產品中內置自動滅菌程序，賽默飛（Thermo Fisher Scientific）作為行業內的重要廠商，其多款培養箱型號均集成了高溫自動滅菌功能，便于用戶定期對箱體內部環境進行滅菌消毒。
本文將詳細介紹賽默飛培養箱中典型的滅菌程序，主要以Heracell VIOS系列和Forma Steri-Cycle系列為代表，說明其工作機制、執行流程、安全注意事項與維護要點。
二、滅菌方式分類
賽默飛培養箱常見的滅菌方式包括以下幾種：
1. 高溫濕熱滅菌（自動）
多數中賽默飛培養箱（如Heracell VIOS、Steri-Cycle）內置高溫濕熱滅菌程序，可將內腔溫度提升至180°C或140°C并保持一定時間（通常為6~12小時），以達到滅菌效果。
該方式模擬實驗室高壓滅菌鍋中的濕熱滅菌原理，適合殺滅細菌、真菌、芽孢等常見污染源。
2. 紫外線殺菌（部分型號）
個別型號（如早期Heracell 150i）配備UV紫外殺菌燈，用于水盤或空氣通道中短時間滅菌。該方式成本較低，但滅菌范圍有限，主要適用于抑制微生物滋生，而非清除污染。
3. 手動化學滅菌（非自動程序）
對于無自動滅菌功能的培養箱，如Thermo 311、160i等，需用戶使用酒精、次氯酸鈉、過氧化氫蒸汽等消毒劑對內腔進行擦拭和噴灑，殺滅殘留微生物。這種方式操作簡便，但對操作規范和人員經驗有一定依賴。
三、高溫自動滅菌程序詳解（以Heracell VIOS為例）
1. 滅菌機制
Heracell VIOS系列培養箱采用高溫空氣對流滅菌技術，程序設定為在180°C ±5°C條件下連續運行6小時，滅菌期間系統將自動關閉所有傳感器與氣體供應，由程序接管控制。
滅菌對象包括：
內膽結構
擱板、支架
門封膠條（耐高溫硅膠材質）
HEPA空氣過濾模塊（耐熱結構）
風扇系統（高溫兼容）
此類滅菌程序已通過驗證，滿足實驗室微生物清除標準（如EN 285、ISO 17665）。
2. 程序啟動條件
內部清空：所有培養皿、培養瓶、液體容器必須移出。
附件拆卸：如CO?檢測管、外接探頭等敏感配件需斷開或保護。
門封檢查：檢查門封是否貼合，防止高溫泄漏。
電源穩定：滅菌程序全程需穩定供電，不可中斷。
3. 操作步驟
以下以Heracell VIOS 160i為例：
進入系統設置
從主菜單選擇“Sterilization"功能。
系統會自動檢查當前狀態是否符合滅菌要求（溫度、門狀態、內部負載等）。
確認操作
屏幕提示確認是否開始滅菌。
用戶需輸入管理員密碼（如已設定），確認執行操作。
滅菌過程
升溫階段（1.5小時）：溫度逐步提升至180°C。
保溫階段（6小時）：維持180°C恒溫滅菌。
冷卻階段（3小時以上）：系統自動降低至安全開啟溫度。
結束提示
滅菌完成后，設備提示“Cycle Complete"。
系統記錄本次滅菌日志，可通過屏幕或數據接口導出。
重新配置
恢復CO?連接。
安裝內部附件。
運行空載測試，確認溫度與氣體控制功能恢復正常。
4. 滅菌周期建議
常規實驗室使用：每1-2個月執行一次。
出現污染事件后：立即執行1次滅菌。
長時間停機后重新使用前：建議先運行1次滅菌。
四、安全注意事項
高溫自動滅菌雖操作便利，但仍需注意以下幾點：
1. 避免人員接觸設備表面
滅菌運行期間設備外殼溫度可能升高，操作人員應遠離，避免燙傷。
2. 嚴禁夾帶液體或塑料器皿滅菌
非耐熱器具在高溫下可能融化或爆裂，導致污染或設備損壞。
3. 滅菌完成前不得強行斷電或開門
中途干預可能導致滅菌失敗、系統損壞或熱氣泄露傷人。
4. 不得高頻率運行滅菌程序
連續滅菌會加速電子元件老化，建議間隔至少兩周以上。
五、常見問題與解決建議
| 問題描述 | 可能原因 | 解決方案 |
|---|---|---|
| 滅菌程序啟動失敗 | 內部殘留樣品、門未關閉 | 清空腔體，重新確認門狀態 |
| 滅菌后設備不供氣或報警 | 系統未恢復CO?供氣模式 | 手動切換至“運行模式" |
| 門封變形或密封不良 | 多次高溫滅菌導致老化 | 更換耐高溫門封 |
| 滅菌完成后顯示溫度未恢復 | 室溫過高或風扇運轉不良 | 延長冷卻時間，檢查風扇狀態 |
| 滅菌日志無法導出 | USB接口未識別或文件格式不兼容 | 更換存儲設備或咨詢廠商支持 |
六、無自動滅菌功能型號的消毒建議
如Thermo 311、160i等型號無內置滅菌程序，可參考以下人工滅菌流程：
1. 物理清潔
用70%乙醇擦拭腔體、擱架、門封等部位。
清洗水盤并高溫高壓滅菌（或使用消毒液浸泡）。
2. 化學消毒
使用0.5%-1%次氯酸鈉溶液擦拭后靜置15分鐘，再用清水擦干。
使用3%過氧化氫噴灑后關閉門30分鐘。
3. 紫外輔助
如有條件，可用便攜式UV燈對內腔照射15分鐘以上。
七、維護與記錄建議
為了保持培養箱在長期運行中的潔凈性與穩定性，推薦建立滅菌與維護記錄：
| 日期 | 滅菌方式 | 責任人 | 效果備注 |
|---|---|---|---|
| 2025-05-01 | 自動高溫180℃ | 張三 | 無異常，運行正常 |
| 2025-03-20 | 手動化學消毒 | 李四 | 略有霉點已清除 |
建議張貼“滅菌記錄表"于設備側面或實驗記錄本中。
若用于臨床或GMP要求環境，應配合SOP文檔執行。
八、總結
賽默飛培養箱配備的自動高溫滅菌程序是提升實驗潔凈度、降低污染風險的重要工具。通過高溫對整腔系統進行定期殺菌，可減少微生物殘留，提高培養環境的可控性，尤其適合對細胞活性要求較高的科研項目。操作過程中需嚴格遵守程序與安全指引，避免誤操作帶來的設備損壞與人身傷害。
對于不具備自動滅菌功能的機型，也可通過科學的化學消毒手段結合日常維護，維持培養箱的清潔狀態。
