ATP檸檬酸裂解酶（ACL）作為關鍵的胞質酶，負責將檸檬酸轉化為乙酰輔酶A，是合成脂肪酸、膽固醇等脂類物質的重要原料提供者，同時參與相關蛋白修飾，在生物體能量與物質代謝中占據核心地位。CheKine™ ATP檸檬酸裂解酶（ACL）活性檢測試劑盒（微量法）以其精準、高效的檢測能力，為科研工作者提供了一種理想的工具，助力深入探究ACL在細胞代謝、脂類合成及疾病機制中的關鍵作用。
ACL主要分布在細胞質中，是胞質乙酰輔酶A合成的關鍵酶。它催化檸檬酸和ATP反應生成乙酰輔酶A、草酰乙酸、ADP和磷酸。乙酰輔酶A作為合成脂肪酸、膽固醇等脂類物質的前體，其生成量直接影響這些生物分子的合成速率。
ACL通過將線粒體產生的檸檬酸轉化為乙酰輔酶A，將糖代謝與脂類代謝緊密連接。在糖代謝旺盛時，檸檬酸通過ACL轉化為乙酰輔酶A，用于脂肪酸和膽固醇的合成，實現能量儲存；在糖代謝受限的時候，乙酰輔酶A可進入三羧酸循環（TCA循環），參與能量產生。此外，ACL還參與調節細胞內能量代謝相關的信號通路，影響細胞的增殖、分化和代謝狀態。
在肥胖和代謝綜合征中，ACL活性顯著升高，導致乙酰輔酶A和脂類物質合成增加，加速脂肪積累和脂代謝紊亂。研究發現，抑制ACL活性可減少脂肪酸和膽固醇的合成，改善胰島素抵抗和高血糖癥狀，具有潛在的治療應用。
腫瘤細胞的快速增殖需要大量脂類物質用于細胞膜合成和能量供應。ACL在多種腫瘤中高表達，為腫瘤細胞的脂類合成提供充足的乙酰輔酶A。通過檢測ACL活性，可以評估腫瘤細胞的代謝狀態，為癌癥的早期診斷和治療提供重要依據。
CheKine™ ACL活性檢測試劑盒采用比色法原理，在ATP和輔酶A存在的情況下，ACL催化檸檬酸生成乙酰輔酶A、草酰乙酸、ADP和磷酸。草酰乙酸隨后被蘋果酸脫氫酶催化，與NADH反應生成蘋果酸和NAD?，導致340 nm處吸光度下降。通過分光光度計測量吸光度變化，可定量檢測ACL活性，評估其在樣本中的功能狀態。
在脂肪酸和膽固醇合成研究中，ACL活性檢測可用于探究脂類代謝的調控機制。例如，研究發現 ACL活性與脂肪酸合成酶（FAS）的表達水平呈正相關，通過調節 ACL活性，可以影響脂肪酸和膽固醇的合成，為治療肥胖和高膽固醇血癥提供潛在靶點。
在腫瘤研究中，ACL活性檢測可用于分析腫瘤細胞的代謝特征。通過檢測不同腫瘤細胞系中的 ACL活性，發現其活性顯著高于正常細胞，且與腫瘤的惡性程度和侵襲能力相關。通過抑制 ACL活性，可以減少腫瘤細胞的脂類合成，抑制腫瘤生長，為腫瘤治療提供新策略。
對于動植物組織樣本，需準確稱量后，利用適當的緩沖液進行勻漿處理，確保細胞充分破裂釋放 ACL。細菌和細胞樣本則需通過離心收集細胞 pellet，用預冷的緩沖液洗滌并制成勻漿。血清樣本需避免溶血和反復凍融，以確保檢測結果的準確性。
嚴格按照試劑盒說明書的操作步驟執行。首先將樣本和標準品加入反應體系，隨后依次加入檢測試劑，包括 ATP、輔酶 A、檸檬酸等試劑，充分混勻后在特定溫度下孵育。孵育完成后，使用分光光度計在 340 nm 波長下測量吸光度值，并依據標準曲線計算 ACL 的活性。
每次檢測應設置空白對照、陰性對照和陽性對照，以確保檢測結果的準確性。對已知濃度的標準品進行重復檢測，計算其變異系數（CV），一般要求 CV 控制在一定范圍內，如小于 10%，以確保數據的穩定性和重復性。
目前市面上有多種 ACL 活性檢測試劑盒，采用不同的檢測原理，如比色法、熒光法等。CheKine™ 試劑盒采用的比色法具有操作簡便、成本較低、檢測快速等優點，適合大多數實驗室常規使用。熒光法具有更高的靈敏度和特異性，但需要配備熒光光度計。因此，在選擇試劑盒時，應根據實驗室設備條件、實驗需求以及對檢測靈敏度和速度的要求，綜合考慮檢測原理的適用性。
CheKine™ 試劑盒適用于多種生物樣本，包括動植物組織、細菌和細胞、血清（漿）等。在購買前，務必仔細閱讀試劑盒說明書，確保其與所檢測的樣本類型相匹配，以保證檢測結果的準確性和可靠性。
試劑盒的靈敏度和檢測范圍是影響檢測結果準確性的關鍵因素。CheKine™ 試劑盒具有較寬的檢測范圍和較高的靈敏度，能夠檢測到樣本中較低濃度的 ACL 活性變化。在選擇試劑盒時，應了解其檢測靈敏度和范圍，并結合實驗中預期的樣本 ACL 活性水平進行選擇。若試劑盒靈敏度不足，可能導致低濃度 ACL 樣本的檢測結果不準確或假陰性，從而影響對脂類代謝狀態或疾病機制的評估。
選擇質量可靠、穩定性好的 ACL 活性檢測試劑盒對于保證檢測結果的準確性和重復性至關重要。在購買前，可通過查看試劑盒的用戶評價、相關文獻引用情況以及生產廠家的信譽和資質等信息，對試劑盒的質量和性能進行全面評估。該產品經過嚴格的質量控制和性能驗證，具有良好的穩定性和批次間一致性，能夠為科研人員提供穩定可靠的檢測結果。同時，注意試劑盒的保存條件和有效期，嚴格按照說明書要求進行保存和使用，以確保試劑的活性和性能不受影響。
1
立即詢價
您提交后，專屬客服將第一時間為您服務