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天津市蘭博實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備有限公司

美國(guó)蘭博液相色譜法測(cè)定牡丹皮中丹皮酚的含量

時(shí)間:2017-12-22 閱讀:2010
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液相色譜法測(cè)定牡丹皮中丹皮酚的含量

牡丹皮為毛茛科植物牡丹的干燥根皮,味苦、性微寒,具有清熱涼血,活血散瘀的功能。丹皮酚是丹皮中重要的有效成分,具有鎮(zhèn)靜、催眠、抗菌、抗炎、抗氧化、降血壓等多種功效。目前采用液相色譜測(cè)定丹皮酚的含量是丹皮及其制劑質(zhì)量的控制指標(biāo)。本文采用天津蘭博的液相色譜系統(tǒng),建立了檢測(cè)丹皮中丹皮酚的含量的方法,結(jié)果顯示方法簡(jiǎn)便,結(jié)果可靠。

1 測(cè)試條件

1.1 儀器

分析型液相色譜儀(HPLC),由AS1000自動(dòng)進(jìn)樣器,Lablliance Series 高壓泵、DAD檢測(cè)器和Lablliance色譜工作站組成,配一支C18 Kromasil 色譜柱( 4. 6 mm × 250 mm, 5 um)AXM-8 Temp.柱溫箱。

 

GC6500美國(guó)蘭博液相色譜儀

1.2試劑和樣品

丹皮酚標(biāo)準(zhǔn)品(中國(guó)藥品生物制品檢定所),甲醇(色譜純),水為屈臣氏蒸餾水,其他試劑為分析純,丹皮樣品購(gòu)自當(dāng)?shù)厮幍辏瑏?lái)源安徽銅陵。

1.3標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

精密稱取丹皮酚標(biāo)準(zhǔn)品4 mg100 mL容量瓶中,用甲醇醇溶解并定容至刻度,搖勻備用,配成40 ug/mL濃度的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。測(cè)定前用流動(dòng)相稀釋成所用濃度。

1.4供試品溶液的制備

取本品粗粉約0. 5 g,精密稱定,置50 mL具塞三角瓶中,精密加入甲醇 25 mL,稱定重量,超聲提取30 min, 放冷, 加甲醇補(bǔ)足減失的重量,搖勻,濾過(guò),精密吸取續(xù)濾液2 mL,置25 mL量瓶中, 加甲醇稀釋到刻度, 搖勻。

1.5色譜條件:

色譜柱:Kromasil (4. 6 mm × 250 mm, 5 um)

流動(dòng)相:50%甲醇-水溶液(v/v

柱溫:室溫;

流速:1.0 mL/min

檢測(cè)波長(zhǎng):274 nm

2測(cè)試結(jié)果:

2.1 色譜系統(tǒng)適應(yīng)性測(cè)試

1.5的測(cè)試條件對(duì)丹皮酚標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行檢測(cè),所得色譜圖如圖1 所示,以丹皮酚計(jì)算理論塔板數(shù)不小于3000

2.2線性關(guān)系、方法檢出限考察

精密吸取丹皮酚標(biāo)準(zhǔn)品溶液2. 04. 06. 08. 010 mL10 mL 量瓶中,流動(dòng)相稀釋至刻度,各進(jìn)樣 20 uL,測(cè)定峰面積積分值。以對(duì)照品溶液濃度(mg/L)對(duì)峰面積進(jìn)行回歸,結(jié)果表明丹皮酚峰面積積分值與濃度C呈良好的線性關(guān)系,回歸方程為: Y = 82. 64 + 41362. 8CR= 0. 9998,線性范圍為 0. 362.2 ug

2.3丹皮酚穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)

取丹皮酚標(biāo)準(zhǔn)品溶液, 于配制后的 0248122024 48 h測(cè)定, 結(jié)果表明在 48 h內(nèi)穩(wěn)定, 峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差 (RSD ) 0.98%

2.4丹皮酚精密度和重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)

取丹皮供試品溶液10 uL重復(fù)進(jìn)樣8根據(jù)所得面積值計(jì)算 RSD =0. 60%取丹皮藥材6平行進(jìn)行提取測(cè)定求得丹皮酚含量的 RSD 1. 82%

2.5丹皮酚回收率實(shí)驗(yàn)

精密稱取 8份丹皮藥材樣品0. 5 g分別加入相當(dāng)于含丹皮酚0. 75 mg0. 25 mg的對(duì)照品溶液各41.4方法提取后進(jìn)樣分析測(cè)得丹皮酚的回收率分別為 97. 96,98. 21RSD 1. 841. 56進(jìn)行加樣法測(cè)定回收率, 平均回收率99. 21% , RSD= 1.60%

3結(jié)論

采用液相色譜對(duì)丹皮酚進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果顯示本方法方便、準(zhǔn)確、精密度高,重現(xiàn)性好,可以用來(lái)對(duì)于藥材適量進(jìn)行監(jiān)測(cè)。

 

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