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三重四極桿TSQ Fortis 針對18種β-受體激動劑的檢測方法

閱讀:866      發布時間:2021-6-21
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本文利用賽默飛全新液相色譜串聯三重四極桿質譜Vanquish Horizon-TSQ Fortis建立了快速檢測18種β-受體激動劑類化合 物的方法。此18種化合物在0.05-500 ng/mL濃度范圍內線性關 系良好(r2>0.993), LOD及LOQ均能滿足國標規定的檢測要 求,運用本方法和設備可實現對動物源性食品中β-受體激動劑 類化合物的檢出和定量。

 

1、引言 β -受體激動劑在醫學臨床上可用于治療支氣管哮喘、阻塞性 肺炎等病癥,同時也可用于治療馬、牛的晚產和流產。 20世紀 80年代初期,一系列試驗研究發現當β-受體激動劑使用劑量 是治療劑量5-10倍時,可以使豬、牛、羊等動物脂肪分解代謝 增強,蛋白質合成速度增加,若長期使用含有β-受體激動劑的 飼料,可以提高飼料轉化率,同時能增加動物體重和肌肉組織 含量,以提高瘦肉率,起到營養再分配作用。但是長期使用會 對機體產生毒副作用。目前豬、牛、羊等動物通常使用過量的 β-受體激動劑類藥物以促進生長,致使β-受體激動劑在動物 機體內造成蓄積。人類食用含有β-受體激動劑殘留的動物性食 品后,會對人體健康造成極大危害,嚴重時可引發急性中毒反 應,常見中毒癥狀表現為肌肉震顫或疼痛,心率過快,頭痛眩 暈、嘔吐等,嚴重時可導致休克造成死亡。 由于β-受體激動劑所產生的危害, 2012年5月1日實施的《飼 料和飼料添加劑管理條例》規定禁止將國務院農業行政部門公 布的包括β-受體激動劑在內的任何物質添加到飼料中。國家標 準《動物源性食品中多種β-受體激動劑殘留量的測定液相色譜 串聯質譜法》(GB/T 22286-2008)適用于豬肝和豬肉中沙丁胺醇、特布他林和塞曼特羅等11種β-受體激動劑的檢測,該方 法利用液相色譜-串聯質譜技術,采用多反應監測(MRM)模 式檢測,內標法定量,目標物的檢出限為0.5 μg/kg。國家標準 《河豚魚、河鰻和烤鰻中12種β-受體激動劑殘留量的測定 液 相色譜-串聯質譜法》(GB/T 22950-2008)適用于河豚魚、河 鰻和烤鰻中溴布特羅、塞曼特羅和克倫特羅等12種β-受體激 動劑的確證和定量,利用液相色譜-串聯質譜法檢測,采用多反 應監測(MRM)模式檢測,內標法定量;萊克多巴胺、沙丁胺 醇、塞曼特羅、克侖潘特羅和克倫特羅的方法檢出限為0.1 μg/ kg,其它化合物的方法檢出限為0.5 μg/kg。

 

2. 實驗部分 2.1 儀器與試劑 2.1.1 Thermo Fisher Vanquish Binary Horizon超高效液相色譜儀 2.1.2 Thermo Fisher TSQ Fortis三重四極桿質譜儀 2.1.3 甲醇(色譜純,美國Thermo Fisher公司);實驗用水為 Milli-Q去離子水;甲酸(色譜純, SIGMA) 2.1.4 18種β-受體激動劑類化合物標準品均購自德國 Dr.Ehrenstrofer公司 2.2 化合物信息及溶液配制 2.2.1 本實驗涉及的18種β-受體激動劑類化合物的基本信息見 表1。

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2.2.2 儲備液:分別精確稱取5 mg標準品粉末,溶解于50 mL甲 醇中 2.2.3 系列標準曲線:以50:50 甲醇水作為溶劑,稀釋成系列標 準曲線 0.02 ng/mL-500 ng/mL 2.3 色譜條件: 色譜柱: Thermo Hypersil GOLD aQ(1.9 µm, 100 x 2.1 mm) ;柱溫: 30℃;進樣量: 5 µL; 流動相: A為0.1%甲酸水, B為0.1%甲酸甲醇,梯度洗脫程序 見表2

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2.4 質譜條件: 可加熱電噴霧電離源(HESI),正離子掃描模式;掃描方 式: SRM;噴霧電壓 (+): 3500V;離子傳輸管溫度: 300℃; 鞘氣壓力38 arb;輔助氣壓力 4 arb;離子源溫度: 450℃;碰 撞氣壓力: 1.5 mTorr;選擇反應監測離子對信息見表3。 表3 18種β-受體激動劑類化合物質譜采集參數

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3.實驗結果與討論 3.1 靈敏度測試 采用上述儀器分析方法, 18種β-受體激動劑類化合物在16分 鐘內均可獲得良好的色譜峰,圖1為18種β-激動劑類化合物在 LOQ(0.05-0.1 ng/mL)濃度的提取離子流圖。

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