引言
聚賴氨酸（Polylysine）是一種由賴氨酸殘基通過肽鍵連接而成的陽離子多肽，因其良好的生物相容性和細胞黏附性，被廣泛用于基因遞送載體和生物材料表面修飾。通過化學修飾將熒光染料異硫氰酸熒光素（FITC）與聚賴氨酸結合，形成FITC-Polylysine復合物，可實現基因遞送過程的實時可視化，為優化載體設計和理解細胞相互作用機制提供新工具。

結構與合成原理
FITC-Polylysine的合成通過氨基反應實現：FITC的異硫氰酸基團與聚賴氨酸的氨基共價結合。FITC的熒光特性（激發波長495 nm，發射波長520 nm）使復合物在細胞內可被熒光顯微鏡或流式細胞儀追蹤。其結構需保持聚賴氨酸的陽離子特性以維持與DNA的靜電結合能力，同時熒光標記需均勻分布以避免影響載體穩定性。

在基因遞送中的應用

1. 載體追蹤與轉染效率評估：

1. FITC-Polylysine標記的質粒DNA或siRNA可實時監測其在細胞內的攝取、內體逃逸和核定位過程。

2. 通過熒光強度與基因表達水平的相關性分析，篩選高效轉染的載體配方（如聚賴氨酸分子量、N/P比）。

2. 細胞毒性研究：

1. 熒光信號與細胞存活率（如MTT實驗）結合，評估載體濃度對細胞活性的影響，優化安全劑量范圍。

在細胞成像中的應用

1. 細胞骨架動態可視化：

1. 聚賴氨酸的細胞黏附性使其可標記細胞外基質，結合FITC熒光，動態觀察細胞遷移和形態變化。

2. 細胞間相互作用研究：

1. 通過熒光共振能量轉移（FRET）技術，分析FITC-Polylysine標記的細胞與鄰近細胞的信號傳遞。

優勢與挑戰

· 優勢：合成簡單，熒光信號穩定，適用于活細胞長時程成像。

· 挑戰：陽離子特性可能導致非特異性細胞吸附，需通過PEG化修飾降低背景信號。