所需儀器:XL03RH型控溫離心機(低速冷凍離心機,可使用24*15ml離心管,水平轉子)
1) 將30ml血液加到含有Na2EDTA的抗凝管里(終濃度5.5mmol/L)
2) 制備1.084g/cm3和1.065g/cm3 Iodixanol溶液
方法如下:
Iodixanol:60% Iodixanol溶液(Optiprep)
稀釋介質:RPMI 1640 + 10%胎牛血清。
1.084g/cm3溶液:1.5ml 60% Optiprep + 4.5ml稀釋介質
1.065g/cm3 溶液:3ml 60% Optiprep + 13.4ml稀釋介質
3) 全血在570g離心15分鐘,棄去上層血漿,取出淡黃色層并與0.4體積的Optiprep混合。
4) 把富含白細胞的血漿/ Optiprep混合物轉移到離心管,上面按順序加入2ml 1.084g/cm3溶液、4ml 1.065g/cm3 溶液和0.5ml稀釋介質。
5) 用甩開吊籃轉子700g離心15分鐘。
6) 降速過程中不制動,收集分界面處的細胞,并且稀釋介質稀釋。
7) 在400g離心6分鐘,把細胞懸浮于適當介質里備用。
湖南湘立研制生產的幾款醫用離心機可以用來進行細胞分離,如DL5M/TDL5M兩種型號的低速冷凍離心機可用來進行干細胞實驗。XL03RH型控溫離心機(低速冷凍離心機)可用來進行溫度敏感型人體細胞分離。
免責聲明
- 凡本網注明“來源:化工儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
- 本網轉載并注明自其他來源(非化工儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發表之日起一周內與本網聯系,否則視為放棄相關權利。