厭氧培養箱的注意事項

厭氧培養箱是一種在無氧環境條件下進行細菌培養及操作的實驗裝置。它能提供嚴格的厭氧狀態恒定的溫度培養條件和具有一個系統化、科學化的工作區域。在厭氧培養箱內操作培養，可以培養難生長的厭氧生物，又能避免以往厭氧生物在大氣中操作時接觸氧而死亡的危險性，因此本裝置是厭氧生物檢測科研的理想工具。本裝置也是一物多用的良好儀器，如改變操作方式，為微需氧菌的生長繁殖提供良好的生長條件，可采用內置.含氧檢測儀(用于自配)，通過檢測及需要并配于操作面板的流量調節裝置。輸入微需氧菌的規定含氧量，可滿足微需氧菌的生長繁殖提供良好的生長條件。

1.儀器盡可能地安裝于空氣清凈、溫度變化較小的地方；

2.開機前應全面熟悉和了解各組成配套儀器、儀表的使用說明，掌握正確使用方法；

3.培養物放入必須是在操作室內達到厭氧環境后放入；

4.如發生故障（停氣等原因）操作室內仍可保持10小時厭氧狀態（超過10小時則根據需要把培養物取出另作處理）；

5.經常注意氣路有無漏氣現象；

6.調換氣瓶時，注意要扎緊氣管，避免流入含氧氣體；

真空泵按要求使用，定期檢查加油。

一、操作室厭氧環境形成

1 按使用要求放置好必要的配件和器具，并向操作室內放入二個無毒塑料袋。

2 通電源開照明燈，開控溫儀，調節所需溫度及安全溫度。

3 操作室內放入1000g鈀粒(封閉)和500g干燥劑,并放入美蘭指示劑(封閉)。

4 關緊取樣室內外門，并抽真空校驗。

5 操作室內DI一次置換（氮氣置換）：

（1）先用橡皮管插入操作室內進氣口，另一頭插入塑料袋。

（2）接通氮氣進氣路，打開氮氣控制閥，使二只塑料袋充足氮氣，然后扎緊袋口。

（3）把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊。

（4）把塑料袋內氮氣漸漸地放于操作室內，至全部放出。

6 操作室DI二次置換（氮氣置換）重復一 次充氮過程，并注意隨時用腳踏開關開閉排氣。

7 操作室DI三次置換（混合氣體置換）：

（混合氣體配比為：N2↑ 85% H2 ↑ 10% CO2↑ 5%）

（1）調換氣路打開混合氣道通閥門進氣，充氣時要隨時腳踏開關開閉排氣。

（2）混合氣充滿塑料袋后，關掉混合氣直通閥（三通閥），使混合氣經過流量計輸入操作并調整流量計，流量為每分鐘10毫升左右。

（3）把塑料袋內混合氣漸漸排于操作室內。

（4）通過三次換氣后，操作室內氣體含氧量已處于極微量狀態。

8 操作室內打開鈀粒除氧劑，接通除氧催化器電源進行催化除氧，一 小時后打開美蘭指示劑（美蘭安瓶）觀察其變況，不變色為操作室內達到厭氧環境。

9 開紫外線滅菌燈，室內進行滅菌處理。滅菌時間自定。

二、菌種的置入和培養

1 檢查取樣室內門并關緊之。

2 打開取樣室外門，將菌種放入取樣室后即關上外門。

3 取樣室充氮置換三次過程：先抽真空度500毫米汞柱（66Kpa）以上停,然后人工打開氮氣閥門進氣,使指針回復零位后進行下次操作。

4 如選定真空度較低就需要增加置換的次數。

5 取樣室內外門開啟，關緊要抽低真空度100毫米汞柱（13 Kpa）檢驗及幫助操作。

6 厭氧培養箱需要長期連續使用的條件：

（1）每天在操作室內打開美蘭指示劑觀察，正常情況下使用。如不正常就必須重新換氣。

（2）要長期連續輸入微量的混合氣體，使補進的氫氣能和微量的氧結合通過催化吸收，保證了室內厭氧狀態，補入混合氣流量選定為每分鐘10毫升左右。

（3）連續培養運行一 天，更換一 次除氧劑和干燥劑。

7 接種棒滅菌器的應用：

（1）隨時用鎳鉻電熱絲使電極短路而變赤熱以進行殺菌（接種棒）

（2）熔蠟處可直接放上，試管封蠟口旋轉熔蠟。

8 操作室里的培養箱內的溫度可任意選擇和控制。

9 混合氣瓶、氮氣瓶輸出壓力調整：調節減壓閥，使輸出壓力為0.1Mpa左右。