資料簡介
FITC-尿素酶是一種將異硫氰酸熒光素(FITC)與尿素酶結合的熒光標記化合物,以下是其詳細介紹:
基本信息
成分:主要由尿素酶和異硫氰酸熒光素(FITC)組成。尿素酶是一種能夠催化尿素水解的酶,廣泛用于生物化學和醫學研究;FITC是一種綠色熒光染料,最大吸收波長為494nm,發射波長為521nm,適用于熒光顯微鏡成像和流式細胞術。
外觀:通常為粉末狀。
質量控制:一般要求質量控制在95%以上。
儲存條件:通常要求儲存于4-8℃或-20℃以下的冰箱中,避免反復凍融和長時間暴露于室溫下,同時要避免光照和高溫等不利條件導致其熒光特性降低或喪失。
保存時間:一般為一年左右。
制備方法
通過化學反應將FITC與尿素酶結合,具體步驟如下:
活化尿素酶:通過NHS酯化反應活化尿素酶的氨基。
FITC標記:將FITC的異硫氰基(NCS)與活化的尿素酶反應,完成熒光標記。
純化:通過透析或凝膠過濾去除未反應的FITC,得到高純度的FITC-尿素酶。
表征:通過質譜(MS)和熒光光譜確認產物的結構和熒光特性。
特點
熒光標記:結合了尿素酶的催化活性和FITC的熒光特性,可用于細胞標記、酶活性檢測和生物成像等多種應用。
良好的生物相容性:FITC與尿素酶結合后,保持了良好的生物相容性,對生物體無明顯毒性。
應用領域
細胞標記:用于標記細胞內的尿素酶,通過熒光顯微鏡觀察其分布和動態變化。
酶活性檢測:通過熒光信號的變化監測尿素酶的催化活性,適用于高通量篩選和定量分析。
生物成像:用于活細胞成像,觀察尿素酶在細胞內的代謝和運輸過程。
藥物機制研究:通過熒光標記的尿素酶,研究其在細胞內的作用機制,包括其對尿素代謝的影響。
注意事項
FITC-尿素酶僅供科研使用,不能用于人體實驗。在制備和應用過程中,需要嚴格控制反應條件和操作步驟,以確保標記效率和特異性。
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