資料簡介
二手羅氏 LightCycler® 480 II 實時熒光定量PCR儀詳盡介紹
一、引言
在分子生物學和臨床診斷領域,實時熒光定量PCR(qPCR)技術以其靈敏度高、操作簡便、可重復性強等特點,成為核酸定量分析的主流方法之一。羅氏公司推出的 LightCycler® 480 II 實時熒光定量PCR儀是適用于中高通量檢測的實驗室設備。隨著二手科研設備流通市場的成熟,該型號的二手儀器因其穩定的性能和合理的價格,在科研、教學與第三方檢測實驗室中仍具有較高使用價值。
本文將從系統組成、技術參數、功能特點、典型應用、使用維護及選購建議等方面,全面介紹二手羅氏 LightCycler® 480 II 實時熒光定量PCR儀的相關信息。
二、系統組成
二手 LightCycler® 480 II 系統主要包括以下幾個組成部分:
主機(熱循環系統與光學系統集成)
搭載精確溫控模塊和多通道熒光檢測系統,支持不同孔板類型。樣本處理組件
包括反應板托盤、96孔或384孔反應板、透明密封膜、離心適配器等。控制與分析軟件
LightCycler® 軟件(版本依儀器出售年份而定),用于實驗設置、數據采集、熔解曲線分析等。附件與外設
如計算機工作站、電源線、USB接口電纜及光學校準片等。
三、技術參數
項目 | 技術指標 |
---|---|
孔板類型 | 96孔、384孔反應板 |
熒光檢測通道 | 支持最多6色熒光通道 |
溫控范圍 | 37 °C – 99 °C |
升降溫速率 | 最快可達 4.8 °C/秒 |
孔間溫度均一性 | ±0.2°C(96孔),±0.4°C(384孔) |
檢測靈敏度 | 可檢測1~5個拷貝的DNA模板 |
支持染料 | SYBR Green I, TaqMan, MGB, FRET, Molecular Beacon等 |
分析功能 | Ct分析、相對定量、絕對定量、基因分型、HRM熔解分析等 |
軟件系統 | LightCycler® 軟件(具體版本取決于原始配置) |
四、功能特點(以實際使用表現為基礎)
1. 熱循環性能穩定
采用高效的銀質加熱模塊與熱電制冷技術,控溫迅速、穩定,在多孔反應板中實現良好的溫度一致性。這一點對熒光定量PCR反應的重復性和可信度至關重要。
2. 多通道熒光檢測
系統最多支持六種熒光信號的同時檢測,便于多重PCR反應開展,可在單次實驗中同時檢測多個基因靶標,提高實驗效率。
3. 靈活的軟件分析平臺
軟件支持數據實時采集、擴增曲線展示、Ct值分析、標準曲線生成、熔解曲線比對、基因型分型、SNP分析等,用戶可根據實驗需求選擇不同的分析模塊。
4. 可適應多種實驗設計
該設備支持常規定量PCR、端點法定量、熔解曲線分析、高分辨率熔解(HRM)分析等,覆蓋從基因表達分析到單核苷酸多態性檢測(SNP)的多種研究需求。
五、典型應用場景
1. 基礎生命科學研究
mRNA 表達量定量分析
轉錄因子調控網絡研究
siRNA 敲減效應驗證
2. 醫學與臨床研究
腫瘤相關基因突變檢測
傳染病病原體核酸定量分析
遺傳病檢測(如BRCA1/2突變、地中海貧血等)
3. 藥物篩選與毒理學評價
藥物誘導的基因表達變化監測
細胞模型中藥效靶點基因分析
4. 食品與環境監測
轉基因成分檢測
食源性病原菌如沙門氏菌、大腸桿菌的快速檢測
水體或土壤中微生物負荷監測
六、購買二手設備的優勢與風險提示
優勢:
成本節約:價格相較新機大幅降低,可顯著減少實驗室預算支出。
性能依舊可靠:若原機使用規范、定期維護,核心部件(如熱模塊與光學系統)性能仍然穩定。
快速部署:無需預定等待制造周期,交貨與上線周期短。
風險與注意事項:
使用壽命評估:應核實機器使用年限與通電時間,部分老舊設備需注意光源老化與溫控漂移問題。
通道校準:確保所有熒光通道功能正常,校準數據是否隨設備附帶提供。
軟件兼容性:需確認舊版軟件能否安裝在當前操作系統中,必要時需搭配老款工作站。
售后與配件:需明確二手設備是否提供技術支持與配件保障,或需額外采購標準化組件。
七、使用與維護建議
1. 操作建議
使用原廠推薦的反應板與封膜,避免因耗材不兼容而影響檢測精度。
建議進行陰性對照、標準曲線、重復孔布置等以驗證實驗穩定性。
定期運行光學檢測和溫控驗證程序,確保信號準確。
2. 日常維護
每次實驗結束后清理孔板托盤區域,避免熒光污染物積累。
避免液體泄漏造成內部腐蝕,實驗區建議設置防溢托盤。
每6~12個月進行一次專業校準和系統檢測,延長儀器壽命。
八、結語
羅氏 LightCycler® 480 II 實時熒光定量PCR儀自推出以來,一直被廣泛應用于多學科分子生物學實驗室。其穩定的性能、多樣的檢測能力與兼容性使其在二手市場中仍具使用價值。通過規范操作與合理維護,二手設備可繼續支持科研項目與檢測任務,為用戶提供可靠的數據基礎。
對于預算有限、或作為教學與初步研究使用的實驗室來說,選購一臺狀態良好的二手 LightCycler® 480 II 是具有性價比的選擇。若搭配完善的技術支持與數據分析方案,該設備仍可在未來多年內持續發揮作用。
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