多肽序列測(cè)定ms-ms檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹

多肽序列測(cè)定是dànbáizhì組學(xué)研究中的一個(gè)核心環(huán)節(jié)，它涉及到對(duì)dànbáizhì或多肽的序列進(jìn)行jīngquè的鑒定。MS-MS，也就是串聯(lián)質(zhì)譜（Tandem Mass Spectrometry），是實(shí)現(xiàn)這一目的的一種強(qiáng)有力的技術(shù)。本文將介紹多肽序列測(cè)定的基本原理、MS-MS技術(shù)的工作機(jī)制以及它在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用。

一、基本原理

dànbáizhì或多肽的序列測(cè)定基于對(duì)其組成氨基酸的識(shí)別。每種dànbáizhì是由20種氨基酸以不同順序組合而成的長(zhǎng)鏈分子，這種順序稱(chēng)為dànbáizhì的序列。測(cè)定一個(gè)dànbáizhì的序列，實(shí)質(zhì)上就是要確定這些氨基酸的排列順序。

二、MS-MS技術(shù)

串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)通過(guò)兩級(jí)質(zhì)譜分析來(lái)實(shí)現(xiàn)多肽序列的測(cè)定。首先，在dìyī級(jí)質(zhì)譜（MS1）中，混合的dànbáizhì樣品被電離成帶電的分子（離子），然后通過(guò)質(zhì)荷比（m/z）進(jìn)行分離。接著，選定特定的離子進(jìn)行第二級(jí)質(zhì)譜（MS2）分析。在MS2中，這些選定的離子被進(jìn)一步分解成更小的片段離子，通過(guò)分析這些片段離子的質(zhì)荷比，可以推斷出原始多肽的氨基酸序列。

三、步驟流程

• 樣本準(zhǔn)備dànbáizhì提取：從生物樣本中提取dànbáizhì，并通過(guò)酶（如yídànbáiméi）切割成多肽。肽段純化：使用色譜技術(shù)（如液相色譜）純化切割后的多肽，以減少樣品復(fù)雜性并提高后續(xù)分析的靈敏度。

• MS/MS分析dìyī級(jí)質(zhì)譜（MS1）：多肽樣品被引入質(zhì)譜儀，并被電離（通常使用電噴霧電離，ESI，或基質(zhì)輔助激光解吸/電離，MALDI）。電離后的多肽離子在dìyī級(jí)質(zhì)譜中被測(cè)量其質(zhì)荷比（m/z）。離子選擇與碎片化：特定的多肽離子根據(jù)其m/z值被選中并送入碰撞室，在那里它們被碎片化。這個(gè)過(guò)程產(chǎn)生一系列代表原始多肽序列不同部分的碎片離子。第二級(jí)質(zhì)譜（MS2）：這些碎片離子的m/z值在第二級(jí)質(zhì)譜中被測(cè)量，生成一個(gè)譜圖，即MS/MS譜圖。

圖1. 蛋白/多肽串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)序流程

四、序列測(cè)定譜圖分析

MS/MS譜圖被分析以鑒定碎片離子的類(lèi)型和順序，這些信息被用來(lái)推斷原始多肽的氨基酸序列。數(shù)據(jù)庫(kù)搜索：使用特定的軟件（如Mascot，SEQUEST，或MaxQuant）將MS/MS數(shù)據(jù)與已知dànbáizhì數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行匹配，以確定多肽的序列。

MS-MS技術(shù)是一種強(qiáng)大的工具，對(duì)于理解生物系統(tǒng)的分子機(jī)制至關(guān)重要。通過(guò)jīngquè地鑒定dànbáizhì和多肽的序列，它幫助科學(xué)家揭示了許多生命過(guò)程的秘密，推動(dòng)了生物醫(yī)學(xué)研究的發(fā)展。隨著技術(shù)的進(jìn)步和應(yīng)用的拓展，MS-MS將繼續(xù)在dànbáizhì組學(xué)及其相關(guān)領(lǐng)域中發(fā)揮重要作用。

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