資料簡介
Protein A-BIOTIN(生物素標記重組蛋白A)是一種經過特殊處理的分子復合物,由蛋白A和生物素兩部分組成,在抗體純化、免疫檢測及蛋白質標記等領域具有廣泛應用。以下從其組成、特性、制備方法、應用及儲存條件等方面展開介紹:
組成與特性
蛋白A:一種存在于金黃色葡萄球菌細胞壁上的蛋白質,具有與免疫球蛋白G(IgG)高度結合的特性,能夠特異性地結合到某些哺乳動物的IgG類抗體的Fc區域。它包含5個抗體結合結構域,主要靶向IgG的Fc區域,形成穩定復合物而不破壞抗體活性。除IgG外,還可通過Fab片段與IgA、IgM等抗體結合,擴展了其應用范圍。在高溫或變性劑(如尿素)存在下仍能維持構象,適合復雜環境下的實驗或生產需求。
生物素:一種水溶性維生素,也稱為維生素H或輔酶R,在生物體內具有重要的生理功能,是多種羧化酶的輔基,參與二氧化碳的羧化過程。
Protein A-BIOTIN:通過化學偶聯法或基因工程法將蛋白A與生物素連接在一起。化學偶聯法需要嚴格控制反應溫度、時間和pH值等參數,以確保修飾效率和產物的純度,優點是修飾效率高,缺點是反應過程中可能會產生副產物,需要進行純化處理。基因工程法可以精確控制蛋白A與生物素的連接方式和比例,得到的修飾產物純度高,生物活性好。
制備方法
化學偶聯法:使用化學試劑和催化劑,將蛋白A與生物素連接在一起。
基因工程法:通過基因工程技術將蛋白A與生物素的編碼基因融合在一起,然后在宿主細胞中表達融合蛋白。
應用領域
親和層析介質:由于蛋白A與IgG具有高度結合的特性,Protein A-BIOTIN可以作為一種親和層析介質,用于純化免疫球蛋白G(IgG)。通過特異性地結合IgG,實現對IgG的純化。在抗體藥物生產中,可作為關鍵原料提高藥物純度(如結合載量達25mg IgG/ml凝膠)。
免疫檢測試劑:Protein A-BIOTIN還可以作為一種免疫檢測試劑,用于檢測免疫球蛋白G(IgG)。通過生物素與親和素或鏈霉親和素的結合,實現對IgG的檢測。
蛋白質標記試劑:通過與生物素結合,Protein A-BIOTIN可以實現對蛋白質的標記和追蹤。利用蛋白A與IgG的結合特性,它也可以用于純化其他與IgG有相互作用的蛋白質。
儲存條件
儲存溫度:通常需在-20℃避光保存,以確保其穩定性和活性。
儲存時間:一般為1年。
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