資料簡介
伯樂 CFX96 熒光定量 PCR 儀詳盡介紹
一、產(chǎn)品概述
CFX96 實時熒光定量 PCR 儀是由 Bio-Rad(伯樂公司)推出的基因擴增與定量分析設(shè)備,屬于CFX系列產(chǎn)品之一。該設(shè)備結(jié)合了高精度溫控系統(tǒng)與多通道光學檢測模塊,廣泛應(yīng)用于生命科學研究、臨床輔助診斷、食品安全檢測、環(huán)境監(jiān)測及農(nóng)業(yè)遺傳分析等領(lǐng)域。
CFX96 是該系列中的標準96孔通量型號,其設(shè)計強調(diào)樣品間一致性、數(shù)據(jù)分析靈活性以及操作流程的便利性,適用于高重復性和中高通量需求的實驗場景。
二、熒光定量PCR技術(shù)原理
熒光定量PCR(Real-Time Quantitative PCR,qPCR)技術(shù)是基于傳統(tǒng)PCR技術(shù)發(fā)展起來的一種實時檢測擴增產(chǎn)物的方法,利用熒光信號變化來監(jiān)控PCR反應(yīng)進程。其基本流程包括:
DNA模板擴增:通過熱循環(huán)進行DNA的指數(shù)擴增;
熒光信號采集:在每一循環(huán)末端采集熒光信號,與目標擴增產(chǎn)物濃度相關(guān);
數(shù)據(jù)分析:通過Ct值(循環(huán)閾值)與標準曲線計算初始模板數(shù)量;
結(jié)果展示:軟件可輸出熔解曲線、擴增曲線、相對表達量分析等數(shù)據(jù)圖譜。
CFX96 將熒光檢測與溫控系統(tǒng)緊密結(jié)合,使用戶能夠?qū)崟r掌握擴增反應(yīng)的全過程。
三、CFX96 主要技術(shù)參數(shù)
參數(shù)類別 | 技術(shù)指標 |
---|---|
通量 | 96孔標準PCR板 |
每孔反應(yīng)體積 | 10–50 μL |
溫控范圍 | 30–100°C |
升溫/降溫速率 | 最大5.0°C/s |
溫控精度 | ±0.2°C(孔間差異<±0.4°C) |
熒光通道 | 標準配備5通道(FAM, HEX/VIC, ROX, Cy5, Quasar 705) |
光源 | 固態(tài)LED |
檢測器 | 光電二極管陣列 |
數(shù)據(jù)輸出 | .xls, .csv, .pdf等格式 |
軟件功能 | 多重定量分析、基因分型、熔解曲線分析、相對/絕對定量等 |
接口 | USB、以太網(wǎng)口,可遠程控制與數(shù)據(jù)傳輸 |
四、儀器結(jié)構(gòu)與核心組件
1. 熱循環(huán)系統(tǒng)
CFX96 采用高性能Peltier熱電加熱器,結(jié)合96孔鋁質(zhì)加熱模塊,提供快速且均一的溫度變化,確保所有孔位的擴增條件一致。
2. 光學檢測系統(tǒng)
CFX96 配備多通道熒光檢測系統(tǒng),通過頂部濾光系統(tǒng)進行熒光激發(fā)與信號采集。每個通道配置獨立LED光源與檢測濾片,可避免信號串擾,實現(xiàn)多重靶標同步檢測。
3. 軟件平臺(CFX Manager)
用戶可通過CFX Manager軟件進行實驗設(shè)計、運行監(jiān)控、數(shù)據(jù)分析及報告導出。軟件支持自動建模、標準曲線生成、表達量歸一化和基因分型分析等。
五、應(yīng)用領(lǐng)域
CFX96 適用于以下研究與檢測領(lǐng)域:
1. 分子生物學研究
基因表達分析(qRT-PCR)
miRNA定量
轉(zhuǎn)錄因子活性監(jiān)測
2. 臨床檢測研究
病原體核酸定量
腫瘤標志物分析
藥物代謝基因檢測
3. 食品安全與農(nóng)業(yè)
轉(zhuǎn)基因成分定量檢測
食源性致病菌篩查
作物基因多態(tài)性研究
4. 環(huán)境微生物分析
水質(zhì)與土壤中微生物DNA定量
環(huán)境抗性基因檢測
六、使用維護建議
為確保CFX96設(shè)備長期運行穩(wěn)定,用戶需關(guān)注以下事項:
日常維護
使用前檢查熱蓋與光學組件,避免灰塵污染;
實驗結(jié)束后清理樣本殘液,保持孔板區(qū)域干燥;
定期校準光學系統(tǒng)與溫控模塊。
軟件管理
保持CFX Manager軟件更新至最新穩(wěn)定版本;
定期備份實驗數(shù)據(jù)及分析報告;
正確設(shè)定用戶權(quán)限,避免誤操作。
操作規(guī)范
孔板與密封膜選擇需與儀器兼容;
控溫前進行熱蓋預(yù)熱,防止冷凝;
熒光通道設(shè)定避免染料重疊,以免影響分析結(jié)果。
七、CFX96 與其他型號對比
項目 | CFX96 | CFX384 | ABI QuantStudio 5 | Roche LightCycler 480 |
---|---|---|---|---|
孔數(shù) | 96 | 384 | 96/384(型號不同) | 96/384 |
光學通道 | 5 | 5 | 4/5 | 6 |
軟件界面 | 圖形化、模塊化 | 同CFX96 | 依型號變化 | 專業(yè)功能豐富 |
優(yōu)勢 | 溫控一致性好,數(shù)據(jù)輸出靈活 | 高通量 | 系統(tǒng)整合度高 | 多重檢測能力強 |
八、二手CFX96選購參考建議
由于CFX96耐用性良好,部分實驗室轉(zhuǎn)讓設(shè)備時狀態(tài)仍較理想。選擇二手設(shè)備時可從以下方面評估:
1. 設(shè)備狀況
樣品孔板是否磨損;
熱蓋開啟是否順暢;
各通道熒光強度是否均一;
檢查系統(tǒng)運行是否有報錯提示。
2. 檢測報告
要求賣家提供:
溫控一致性報告;
熒光校準數(shù)據(jù);
模擬實驗Ct值穩(wěn)定性測試。
3. 軟件與許可證
確認CFX Manager是否可正常安裝與授權(quán);
如為舊版本,可聯(lián)系Bio-Rad代理了解兼容性問題。
4. 技術(shù)支持
優(yōu)先選擇提供短期質(zhì)保與培訓服務(wù)的渠道;
了解是否可購買耗材(如原裝密封膜、孔板);
確認是否兼容現(xiàn)有實驗室PC環(huán)境。
九、常見問題與解答
Q1:是否可用于多重熒光探針分析?
A:可支持5色通道并行檢測,適合常規(guī)TaqMan探針、SYBR Green以及其他染料組合的多重反應(yīng)。
Q2:CFX96是否可進行熔解曲線分析?
A:支持熔解曲線檢測,適用于SNP分型、特異性驗證等應(yīng)用。
Q3:是否支持遠程控制?
A:具備網(wǎng)絡(luò)連接功能,通過以太網(wǎng)或局域網(wǎng)可實現(xiàn)遠程監(jiān)控、數(shù)據(jù)傳輸與操作。
十、結(jié)語
伯樂 CFX96 熒光定量PCR儀作為實驗室常用的實時擴增平臺之一,憑借穩(wěn)定的溫控系統(tǒng)、多色熒光通道、友好的用戶界面,在科研與檢測領(lǐng)域均有廣泛應(yīng)用。對于二手市場的設(shè)備,在合理評估和維護的前提下,依然可以發(fā)揮可靠性能,滿足多樣化的實驗需求。
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