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色譜柱常見問題（一）
2020年06月02日 14:17:09
來源：化工儀器網(wǎng) 點擊量：6240
色譜柱是色譜的重要配件，了解色譜柱有助于我們更好的使用色譜儀。
【化工儀器網(wǎng) 技術(shù)指導】色譜柱是色譜的重要配件，了解色譜柱有助于我們更好的使用色譜儀。
1、色譜柱的柱子是否可以反沖？什么樣的柱子可以反沖，什么不可以？反沖后是正著用，還是反著用？
一般的正相反相柱應(yīng)該都能反沖，只有兩端篩板孔徑不對稱的柱子不能反沖，不過目前這樣的柱子已經(jīng)比較少見。反沖是為了把柱頭的污染物沖洗掉，反沖后還是正著用比較好，以免柱子的兩頭都被污染。因此，我們提倡正向使用，反向沖洗。
2、拿到一根新柱的時候應(yīng)該怎樣進行活化及維護？為什么要這樣做？
新柱活化實際上是一個平衡的過程，除了用流動相平衡外，有時候還必須用所測樣品對新柱進行平衡，特別是測定分子量比較高的多肽時。平衡方式即多進幾次樣品，直到峰面積和保留時間穩(wěn)定，再進行正式進樣測定。如果要加快平衡時間，把前面用來平衡的進樣樣品濃度加大，或者不等洗脫完成，連續(xù)進樣多針。
用待測物對新柱平衡，目的是將硅膠基質(zhì)填料表面具有非特異性吸附的位點的吸附能力飽和。
3、測定多肽，一般采用什么柱子？
分子量不高的多肽一般選用常規(guī)C18柱就能測定。也可以用離子交換柱、水性C18柱和Hilic親水作用柱。
4、氨基柱在進酸性樣品時，使用一段時間后，柱效降低，峰形改變，如何恢復？
氨基柱測酸性樣品，應(yīng)該是用氨基柱的HILIC模式。使用后，用5-10倍的柱體積的含0.5-1.0%NH3的乙腈-水(50:50)溶液沖洗該柱，沖洗后當然要再用不含堿的流動相洗去多余氨。
5、柱子在什么情況下可以清洗篩板呢？
柱頭污染了，就取出污染的，再裝一些填料。
5、如果柱子取下來放置一段時間，需要做什么保護嗎？
對一般的反相柱，需要在洗干凈后放到純甲醇(乙腈)或者是80%左右的甲醇(乙腈)水中，然后用堵頭塞緊柱兩頭，以免保存溶劑揮發(fā)。不需要做特殊的保護。
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