化工儀器網手機版
移動端訪問更便捷
實現多重檢測 我國推動實時熒光PCR技術再上新臺階
2022年03月23日 10:01:42
來源：化工儀器網 作者：宋池 點擊量：5476
近期，廈門大學研究團隊成功研發出一種熒光PCR新技術，將熒光PCR的單管檢測能力提高了至少一個數量級，推動了主流熒光PCR儀器檢測技術的發展。
【化工儀器網 項目成果】近期，廈門大學研究團隊成功研發出一種熒光PCR新技術，將熒光PCR的單管檢測能力提高了至少一個數量級，推動了主流熒光PCR儀器檢測技術的發展。研究成果發表在《美國國家科學院院刊》(PNAS)雜志上。
作為目前最為成熟、臨床應用最廣泛的分子診斷技術，PCR(聚合酶鏈式反應)技術具有靈敏度高、特異性好、及時方便等優點，在傳染性疾病檢測、腫瘤個體化診療、遺傳性疾病篩查、血液篩查等領域有著巨大的應用價值，已經成為許多臨床診斷的“金標準”。在疫情期間，PCR技術在病毒核酸檢測中發揮了重要作用，其發展也更受重視。
PCR技術發展至今已經衍生出多重PCR (multiplex PCR)、實時熒光定量PCR、數字PCR(digital PCR)等多種技術。其中第二代技術——實時熒光定量PCR是當前的主流。該技術通過特異性熒光探針實時監測擴增片段熒光信號，同時實現了絕對基因表達和相對定量檢測。同時通過閉管檢測的模式降低了擴增產物的污染機會，節省時間和勞動力，有利于自動化的實現。
然而實時熒光定量PCR的檢測能力受限于儀器檢測通道數目，單個反應能檢測到的靶基因數量很難超過6個(2-4)。在PCR之后添加熔解分析步驟是研究者解決這一問題的嘗試，雖然在一定程度上增加了可檢測靶基因數目，但也存在檢測成本升高、檢測錯誤率增加等問題。靶基因檢測數量的局限使實時熒光定量PCR技術在涉及多靶點的復雜疾病檢測中難以發揮作用。
2022年2月24日，廈門大學生命科學學院研究團隊在《美國國家科學院院刊》(PNAS)雜志上發表了一項研究成果，報道了一種稱為“MeltArray”的單步、多重均相熒光PCR新技術。
該技術利用了熒光PCR反應中Taq DNA聚合酶的5‘-瓣狀內切酶活性，將位于引物下游的“媒介探針”切割，釋放出“媒介引物”，“媒介引物”結合到反應體系中的分子信標報告探針上。在Taq酶聚合活性作用下，“媒介引物”沿著分子信標延伸，生成具有特定熔點值的熒光雙鏈。由于每個分子信標可以允許多個“媒介引物”形成一系列具有不同熔點值的熒光雙鏈，單個MeltArray多重熒光PCR反應可檢測的總靶基因數目就等于反應中分子信標數量乘以其所容納的“媒介引物”數量。
為驗證MeltArray的多重檢測能力，研究者設計了多種檢測體系，包括人類Y染色體微缺失的20重檢測、確定大腸桿菌血清型的62重檢測、同時識別和定量呼吸道病原體的24重檢測、直腸癌組織樣本的KRAS突變微測序分析等，對應了分子診斷的遺傳病、傳染病和腫瘤分子診斷三大應用領域，均有良好的靈敏度和特異性。
在高通量測序技術出現后，靶基因檢測數量有限的實時熒光定量PCR通常被認為是“低端”的檢測技術。MeltArray不需要改變現有的熒光PCR儀器就極大增加了單個閉管實時熒光PCR一步法能檢測的最大靶基因數量，推動熒光PCR這一“老技術”再上“新臺階”，填補了長期存在于低階PCR和高通量檢測二者之間的技術空白。
(資料來源：科技部生物中心、IVD從業者網)
相關閱讀 Related Reading
查看更多+-
真邁生物完成2.8億元C 輪融資，加速基因測序國產替代與技術出海雙向突破
5月28日，深圳市真邁生物科技有限公司宣布完成2.8億元C 輪融資。此次融資，公司將錨定“商業化生態建設”與“全球化拓展布局”兩大...2025-05-30 13:36:26 -
5 月 27 日，清風生化科技(廣州)有限公司與賽納生物科技(北京)有限公司正式簽訂合作協議，雙方將攜手共進，致力于打造 “基因測...2025-05-30 11:59:04
-
超1.2億元采購！89%鎖定國產，海南313臺檢驗類設備更新（附清單）
海南省計劃近期召開2024年超長期特別國債“以舊換新”項目醫療設備檢驗類設備調研會，涉及檢驗類設備共313臺，總預算12677萬元...2025-05-29 11:37:17 -
近日，中國水產科學研究院長江水產研究所就“直屬單位設施設備修繕購置項目（長江瀕危水生動物保護研究基地（營養與飼料）儀器設備購置）”...2025-05-29 09:24:09
-
近日，生態環境部南京環境科學研究所就“國家環境保護農藥環境評價與污染控制重點實驗室分析儀器設備購置項目”發布公開招標公告，預算金額...2025-05-28 09:10:09
-
日前，京津冀國家技術創新中心現發布2025年度“細胞與基因治療”領域項目申報指引。《國家重點研發計劃顛覆性技術創新重點專項2025...2025-05-27 10:06:58
版權與免責聲明
- ①凡本網注明“來源：化工儀器網”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品，未經本網授權不得轉載、摘編或利用其他方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的，應在授權范圍內使用，并注明“來源：化工儀器網”。違反上述聲明者，本網將追究其相關法律責任。
- ②本網轉載并注明自其他來源（非化工儀器網）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責，不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時，必須保留本網注明的作品第一來源，并自負版權等法律責任。
- ③如涉及作品內容、版權等問題，請在作品發表之日起一周內與本網聯系，否則視為放棄相關權利。
