摘要
本文建立了食品中7個茶多酚類化合物的HPLC 測定方法,包括咖fei因、兒茶素(dl-C)、表兒茶素(EC)、沒食子兒茶素沒食子酸酯(GCG)、表沒食子兒茶素(EGC)、表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)和表兒茶素沒食子酸酯(ECG)。參考《關于巴拉圭冬青葉(馬黛茶葉)等9種“三新食品"的公告》中色譜條件并進行優化,采用色譜柱ShimNex CS C18(150mm短柱),20min完成7種茶多酚類化合物的分析,結果顯示,7個化合物峰峰型對稱,重現性和分離度良好,效率高,滿足檢測要求。
1. 實驗部分
ShimNex CS C18
5 μm,4.6×150 mm
1.1實驗儀器及耗材
Shimadzu LC-20AD高效液相色譜儀;
色譜柱:ShimNex CS C18(5 μm,4.6×150 mm;P/N:380-01230-02);
純水機:PR-FP-0120α-MT1(+ 60L水箱 + 取水器);
SHIMSEN Disc HPPTFE針式過濾器(P/N:380-00341);
LC-MS認證樣品瓶LabTotal Vial(P/N:227-34001-01);
Nichipet Air移液槍:Nichipet Air 0.5-10 μL(P/N:00-NAR-10);
Nichipet Air 10-100 μL(P/N:00-NAR-100);
Nichipet Air 100-1000 μL(P/N:00-NAR-1000);
Nichipet Air 1000-10000 μL(P/N:00-NAR-10000)。
1.2 混合標準工作溶液的制備
分別精密稱取咖fei因、兒茶素(dl-C)、表兒茶素(EC)、沒食子兒茶素沒食子酸酯(GCG)、表沒食子兒茶素(EGC)、表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)和表兒茶素沒食子酸酯(ECG)標準品適量,加50%甲醇溶解并稀釋制成每l mL中各含100 μg的溶液,作為高濃度混合標準工作溶液;取高濃度混合標準工作溶液適量,用50%甲醇稀釋制成每1 mL中各約含0.5 μg的溶液,作為低濃度混合標準工作溶液。
1.3 分析條件
色譜柱:ShimNex CS C18(5 μm,4.6×150 mm;P/N:380-01230-02)
柱溫:40℃
檢測波長:210 nm
流速:1.1 mL/min
進樣量:10 μL
流動相:A:0.1%磷酸水溶液
B:0.1%磷酸甲醇溶液
梯度洗脫程序如下:
2. 實驗結果
按照上述色譜條件(1.3)進行采集,混合標準工作溶液色譜圖如下:
高濃度混合標準工作溶液(100 μg/mL)
低濃度混合標準工作溶液(0.5 μg/mL)
重復性
低濃度混合標準工作溶液(0.5 μg/mL)重復性
結論
本文建立了食品中7個茶多酚類化合物的HPLC 測定方法。參考《關于巴拉圭冬青葉(馬黛茶葉)等9種“三新食品"的公告》中色譜條件并進行優化,采用色譜柱ShimNex CS C18分析7種茶多酚類化合物,結果顯示,7個化合物峰峰型對稱,重現性和分離度良好,效率高,滿足檢測要求。
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